内毒素去除及检测服务

德泰内毒素去除及检测服务是原核蛋白表达纯化服务的一项重要服务项目。内毒素广泛存在于革兰氏阴性菌（如大肠杆菌E.coli）细胞壁中。大肠杆菌在表达重组蛋白过程中，会产生大量内毒素。内毒素作为一种热源，会导致生物体发生炎症发热反应，所以当重组蛋白应用于某些动物实验时，需要进行内毒素去除，以免导致动物产生不良反应，进而影响实验结果。

重组蛋白的应用	高内毒素	低内毒素
体外酶活实验	无影响	无影响
蛋白抗原，制备抗体	无影响	无影响
体外细胞分化培养	会有影响	要求低内毒素 < 1EU/ug
小鼠药效评价	影响大	要求低内毒素 < 0.1EU/ug
其他动物体内实验	有影响	要求低内毒素

内毒素去除的一般过程

内毒素控制和去除，是基于内毒素结合肽纯化树脂的原理，需要从蛋白制备实验的开始就进行控制，实验中所有用到的器皿，仪器，水，试剂，移液器吸管，都做内毒素去除。同时，实验在洁净间中完成，确保很低的内毒素水平。

重组蛋白制备过程的内毒素控制及去除

内毒素定量检测方法

内毒素的检测方法包括半定量的凝胶法检测和绝对定量的显色法。基于鲎试剂的显色法和凝胶法，是目前国际上最精准的检测方法，很多制药巨头如默克，Lonza，都在优先使用该方法。

内毒素小知识

什么是内毒素

内毒素（endotoxin）是革兰氏阴性细菌细胞壁中的一种成分，叫做脂多糖(LPS)。脂多糖对宿主是有毒性的。内毒素只有当细菌死亡溶解或用人工方法破坏菌细胞后才释放出来，所以叫做内毒素。其毒性成分主要为类脂质A。各种细菌的内毒素大致相同，可引起发热、微循环障碍、内毒素休克及播散性血管内凝血等。内毒素耐热而稳定，160℃ 2-4小时才可被破坏。一般环境中，如空气中微尘，普通水，未处理仪器和器皿，都有内毒素。涉及细胞和动物实验时，一般对内毒素控制都有要求。