杂交瘤抗体基因测序

杂交瘤细胞在保存过程中易存在污染、基因丢失、细胞状态不好甚至死亡等问题，这些都会影响产生的抗体质量。通过将杂交瘤细胞中的抗体基因提取并测序，得到相应的核苷酸序列，以便于后期外源抗体的稳定表达生产。

德泰生物拥有杂交瘤测序平台和Failsafe^®假基因排除技术，可提供基于Sanger测序与高通量NGS测序两种方案的杂交瘤抗体基因测序服务。服务基于RACE技术，可准确测定抗体可变区或全长序列。Sanger测序经济快速，5天交付结果，适合单克隆验证；NGS测序可实现深度覆盖，精准鉴定稀有克隆及突变，适合复杂样本分析。测序范围涵盖小鼠、大鼠、兔、山羊等物种，结合德泰成熟的抗体表达平台，可获得抗体基因并进行表达纯化验证。

服务优势

极速体验：Sanger测序5日交付，NGS测序12日交付
细胞需求少：低至1~5细胞/孔，可以接收孔板样品
自主研发：高效的酶和引物，保证100%成功率
技术先进：可测小鼠、大鼠、兔、山羊等物种的IgM和IgG的所有亚型
准确性高：采用Failsafe^®假基因排除技术，可排除κ轻链假基因
一站式服务：德泰生物拥有丰富经验，可提供表达验证服务

服务流程

Sanger测序

服务流程

NGS测序

服务流程

服务内容

Sanger测序

阶段	服务内容	周期	交付
阶段Ⅰ 第一链cDNA扩增	细胞裂解扩增第一链cDNA	5天	详细的实验报告轻重链测序报告包含抗体片段的质粒（可选）至少交付0.5mg抗体 SDS纯度≥90%（可选）
阶段Ⅱ 抗体基因扩增	基因预扩增分段基因特异性扩增
阶段Ⅲ 测序	克隆至载体 Sanger测序生物信息学分析
阶段Ⅳ 抗体表达验证（可选）	转染级质粒制备瞬时转染表达 ELISA验证	2天
阶段Ⅴ 亚克隆（可选）	以阶段Ⅲ的质粒为模板进行亚克隆分别构建轻重链的表达质粒	2天
阶段Ⅵ 抗体表达与纯化（可选）	转染级质粒制备瞬时转染表达亲和纯化质量检测QA/QC	7天

NGS测序

阶段	服务内容	周期	交付
阶段Ⅰ cDNA扩增	细胞裂解 RNA提取反转录cDNA	12天	NGS测序报告
阶段Ⅱ 文库构建	测序文库构建
阶段Ⅲ 文库测序	Illumina平台测序生物信息学分析