德泰生物可以提供大规模蛋白纯化、融合标签蛋白纯化、无标签蛋白纯化等多种蛋白纯化技术服务。同时也提供蛋白纯化树脂及预装柱。我们提供的详细蛋白纯化服务有：
德泰可提供多种蛋白纯化服务，满足客户的不同需求，如需要无标签的纯化蛋白用于结构分析，需要将自然界获取的天然蛋白纯化，需要克级或千克级以上的可溶性蛋白等。具体服务内容如下：
先进的AKTA纯化系统和全套预装纯化柱，适合纯化不同来源的重组蛋白或天然蛋白多种蛋白纯化系统（亲和色谱、离子交换、分子筛、疏水色谱、HPLC等）提供全面的蛋白纯化分析报告和蛋白质量检测报告。
蛋白纯化实验流程：
我们的纯化策略侧重于在提高蛋白纯度的同时减少蛋白表达量的损失。因此我们常采用多种纯化方式混合纯化的方法，常用的纯化方法有：
| 纯化方法 | 简述 |
|---|---|
| 亲和纯化 | 利用目的蛋白与其特异性配体之间的亲和力分离蛋白 |
| 离子交换色谱法 | 将离子交换剂与目的蛋白的电荷结合，通过改变PH或增加离子强度的缓冲液洗脱目的蛋白 |
| 凝胶过滤色谱法 | 主要依据蛋白质分子量和分子形状进行分离 |
| 疏水色谱法 | 利用蛋白与疏水配体绑定的可逆作用进行分离纯化 |
| 高效液相色谱法 | 与传统的液相色谱柱相比，具有分离效能高，检测灵敏度高、分析速度快等优势 |
我们交付的蛋白默认保存在Tris缓冲液中，如果客户对蛋白保存条件有要求，我们还可提供其他缓冲液或冻干服务。
亲和纯化是利用待分离物质和它的特异性配体间的特异亲和力，达到分离目的的一类纯化技术。这里主要介绍His/GST亲和纯化原理和实验步骤(流程)。
凝胶过滤色谱又称分子筛，蛋白纯化方式之一。是应用蛋白质分子量或分子形状的差异去进行分离的一项纯化技术。
离子交换色谱是利用离子交换剂上的可交换离子与周围介质中被分离的各种离子间的亲和力不同，经过交换平衡达到分离目的的一种纯化方法。
蛋白表达纯化时标签的选择对蛋白会产生一定影响，如表达量，可溶性及蛋白的下游应用。本文主要分析了几种常用标签的优缺点和适用性。
蛋白纯化的方法主要有四种，选择合适的纯化方法有助于获得更好的蛋白，本文主要从蛋白的性质入手，指导实验选择合适的蛋白纯化方法。
蛋白纯化是蛋白表达实验中的重要一步，蛋白纯化有不少技术难点，本文主要是根据经验总结蛋白纯化的相关问题并提出解决方法。
无标签蛋白多步纯化 – 目标蛋白 Protein V1 (~14.7Kd), 杂蛋白 (~10Kd)
Lane 1: 初步纯化后的目标蛋白与杂蛋白，靠的很近
Lane 2 – 15: 经过离子柱,分子筛与疏水柱,多重纯化,目标蛋白被分离
该项目难点: 无标签蛋白，杂带与目的蛋白靠的很近
蛋白表达为包涵体的情况并不少见，尤其是在大肠杆菌蛋白表达系统中，80%的蛋白都会形成包涵体。复性的难点在于复性条件的摸索与试剂的选用，德泰的蛋白复性服务会通过筛选多种复性条件，确保蛋白正确折叠，保证交付蛋白的可溶性。
如果客户的蛋白无法正常折叠，我们推荐选用上清优化型原核蛋白表达服务。该服务可以将目的蛋白表达在上清液里，能够获得更高的天然活性和纯度。
包涵体蛋白纯化，如何复性？
包涵体蛋白纯化方法二：稀释复性
南京德泰生物工程有限公司 Nanjing Detai Bioengineering Co.,Ltd. ©2024 All Rights Reserved
苏公网安备32011202001300